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差示扫描量热法如何测量生物分子稳定性
时间:2022-08-26      阅读:189
  差示扫描量热法如何测量生物分子稳定性
  差示扫描量热法(主要用于表征生物分子(如蛋白质)的稳定性。重要的是,它是对其天然形式的生物分子的直接测量。差示扫描量热法测量可以提供关于热稳定性的数据,并作为结构指纹来评估构象。通过以恒定速率加热分子,测量与生物分子热变性相关的热量变化。差示扫描量热法的优点;由于差示扫描量热法依赖于热测量,因此可以表征天然生物分子,而不必具有光学透明的样品。通过差示扫描量热法测量的特性提供了熔化温度,但也提供了生物分子内折叠和展开力的数据。
  差示扫描量热法经常用于药物开发。可以使用热量计的一些关键领域包括:生物治疗开发中稳定蛋白质和潜在候选物的选择和表征;配体的相互作用研究;制造和纯化条件的优化;确定液体制剂的条件;了解基本平衡热力学
  要了解差示扫描量热法的工作原理及其可为准确生物分子测量提供的好处,了解基本平衡热力学非常重要。本质上,蛋白质和其他生物分子可以在N和D构象之间转移:N–结构化、天然和生物活性构象;D–非结构化、变性和无活性的构象;这种转移是通过温度升高超过特定范围而发生的。该过程不仅限于蛋白质。其他受影响的生物分子包括:有机聚合物;生物大分子,如DNA和脂质;差示扫描量热法中使用的仪器;用于差示扫描量热法测量的关键仪器是热量计。较新的型号,在采样和分析方面提供了许多自动化优势。样品加载后仪器的无人值守操作可以节省操作员的时间,提高工作效率。自动化数据分析可以更快地生成高度可重复的热稳定性数据并符合法规要求。差示扫描量热法仪器使用和协议;正确的使用方法和协议对于确保正确准备仪器和样品以及安全执行实验至关重要。
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